日本血液净化：【临床研究】老年亚临床动脉粥|日本干细胞治疗疾病

日本血液净化：【临床研究】老年亚临床动脉粥

[本文为疾病百科知识，仅供阅读] 　发布日期：2020-10-03 　　阅读：131

　　　　目的

　　　　探讨老年亚临床动脉粥样硬化(AS)患者血清胆固醇酯脂肪酸水平，以期为早期预防AS提供实验室数据支持。

　　　　方法

　　　　回顾性研究纳入2013年8—12月北京医院老年体检志愿者180例(年龄≥60岁)，包括颈动脉内中膜中层厚度(cIMT)>1(亚临床AS组)92例和健康对照者(对照组)88例，抽取空腹静脉血。用液相色谱串联质谱法测定志愿者血清中11种胆固醇酯脂肪酸，计算各脂肪酸脱氢酶及脂肪酸碳链延长酶活性。同时用常规方法分析血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白AI(ApoAI)、载脂蛋白B(ApoB)、超敏C反应蛋白(hsCRP)等生化指标，用独立样本t检验、非参数检验、Logistic回归等对以上数据进行分析。

　　　　结果

　　　　与对照组相比，老年亚临床AS患者的年龄、TC、LDL-C和ApoB的水平显著偏高，血清CE16：1和Δ9-脂肪酸脱氢酶(Δ9-desaturase)显著升高，CE22：6则显著降低；校正年龄、性别、体质指数、TC、TG、HDL-C、LDL-C等可能混杂因素影响后，与最低四分位数(Q1：CE22：6≤0.44%)相比，CE22：6最高四分位数(Q4：CE22：6>0.71%)患亚临床AS的比值比为0.29(95%CI:0.11～0.78，Waldχ2值6.009，P<0.05)；CE16：1和Δ9-desaturase在校正混杂因素后差异无统计学意义。Spearman偏相关分析结果显示CE22：6与心血管疾病危险指标中的ApoA、TC和HDL-C显著负相关(r分别为－0.166、－0.149和－0.194；均P<0.05)，而与其他指标关系差异无统计学意义。

　　　　结论

　　　　CE22：6可能对亚临床AS具有保护作用，平衡脂肪酸摄入对早期预防基于AS的心血管疾病具有重要意义。

　　　　动脉粥样硬化(AS)包括亚临床AS(AS疾病临床前期病变)和终末期即缺血性心血管疾病。颈动脉内膜中层厚度(cIMT)是AS内膜损害的重要标志[1]，可有效评价亚临床AS和预测临床事件，已被多项大规模前瞻性临床研究证实是预测未来心血管事件的独立危险因素[2]。研究发现，饮食摄入的脂肪性质与心血管疾病发生发展密切相关[3,4]，监测亚临床阶段AS患者血清脂肪酸的组成对早期防治心血管疾病具有重要意义。本研究拟以cIMT作为判断亚临床AS的标准，分析老年人中处于亚临床AS阶段的人群与健康对照组中血清胆固醇酯脂肪酸含量的变化，以探讨两者关系，为早期防治心血管疾病提供实验室依据。

　　　　对象和方法

　　　　一、对象

　　　　收集2013年8—12月在北京医院体检中心进行健康体检的老年人457例，最后纳入研究的共180例，其中男102例，女78例，年龄60～97岁，平均(69.2±6.3)岁。排除标准：已诊断为糖尿病、高血压、冠心病者，以及患有恶性肿瘤、血液系统疾病、慢性阻塞性肺疾病、自身免疫系统疾病、感染性疾病等患者。入选人群除无以上疾病外，2个月内未服用深海鱼油等保健品。其中cIMT>1(亚临床AS组)共92例，cIMT<1(健康对照组)88例，本研究通过北京医院伦理委员会批准，参加者均签署了知情同意书。

　　　　二、方法

　　　　1．试剂和仪器：

　　　　配制脂肪酸标准溶液所用的标准购自美国NuchekPrep.Inc公司。乙腈、正己烷和异丙醇为高效液相级，购自Fisher公司(美国)。甲酸铵购自美国Sigma-Aldrich公司。总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A(ApoA)、载脂蛋白B(ApoB)等试剂盒为日本积水公司产品。超敏C反应蛋白(hsCRP)为罗氏公司试剂盒。

　　　　本研究使用的主要分析仪器是液相色谱串联质谱联用系统(LC/MS/MS)，包括高效液相色谱仪Agilent1200(Agilent公司，美国)、串联三重四极杆质谱仪API4000和Analyst1.4.2数据处理软件(AppliedBiosystems公司，美国)。

　　　　2．测定条件和方法：

　　　　采用本实验室建立的LC-MS/MS法[4,5]检测血清胆固醇酯脂肪酸：用异丙醇沉淀血清蛋白后提取上清液进行质谱分析。液相色谱条件：分析所用的色谱柱为Nova-PakC18柱(2.1mm×150mm，粒径4μm，Waters公司，美国)，流动相为A相(异丙醇∶乙腈∶正己烷＝55∶45∶15)：B相(含100mmol/L甲酸铵的甲醇溶液)为95%：5%，流速为0.3ml/min，柱温30℃，进样1μl。质谱使用电喷雾电离源(ESI)正离子模式和多反应监测(MRM)模式分析。以归一化法进行定量，共测定血清中11种主要胆固醇酯，包括CE14：0、CE16：0、CE16：1、CE18：0、CE18：1、CE18：2、CE18：3、CE20：3、CE20：4、CE20：5、CE22：6。

　　　　TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA、ApoB、载脂蛋白C2(ApoC2)、载脂蛋白C3(ApoC3)和hsCRP等生化指标采用7180自动生化分析仪进行分析，测定前校准机器并分析质控品，质控合格后进行测定。

　　　　3．测量指标的定义：

　　　　cIMT测定采用高分辨率彩色血管多普勒超声仪进行颈动脉超声检测，根据横断面和纵轴扫描情况，取颈总动脉起始处至分叉处内中膜中层最厚处进行测量，探头频率在7.5～10MHz。cIMT定义为扫描图像中两条分别代表颈动脉腔内膜表面和富含胶原的外膜上层之回声线前缘之间的距离。

　　　　根据产物及其对应的前体比率计算得出[6]各脂肪酸相关酶的活性：Δ9-脂肪酸脱氢酶活性(Δ9-desaturase)＝CE16：1/CE16：0，Δ6-脂肪酸脱氢酶活性(Δ6-desaturase)＝CE18：3/CE18：2，Δ5-脂肪酸脱氢酶活性(Δ5-desaturase)＝CE20：4/CE20：3，碳链延长酶活性(elongase)＝CE20：3/CE18：3。

　　　　三、统计学方法

　　　　采用SPSS17.0软件进行分析。采用独立样本t检验分析呈正态分布的样本间的两两比较，选用非参数检验(Mann-WhitneyU)进行非正态分布的两独立样本间比较。具有统计学意义的定量数据用四分位数进行分组，并采用Logistic回归和最大似然比检验(Waldχ2检验)分析其与亚临床AS的相关性。同时采用非参数Spearman相关分析法研究血清胆固醇酯脂肪酸和其他生化指标的相关性。以双侧P<0.05认为差异有统计学意义。

　　　　结果

　　　　一、亚临床AS组和对照组基本特征

　　　　亚临床AS组和对照组患者的年龄、体质指数(BMI)、hsCRP、血脂指标呈正态分布，见表1。其中，与对照组相比，亚临床AS组的年龄、TC、LDL-C、ApoB水平均较高(P<0.05)。

　　　　二、亚临床AS组和对照组脂肪酸含量比较

　　　　由于本研究180例受试者的血清脂肪酸含量大多呈非正态分布，因此选用两个独立样本的非参数检验(Mann-WhitneyU)对亚临床AS组和对照组脂肪酸含量进行分析。由表2可知亚临床AS组血清CE16：1和Δ9-desaturase显著高于对照组，CE22：6则显著低于对照组，其他各脂肪酸及脂肪酸酶活性的差异无统计学意义。进一步采用Logistic回归和Wald检验分析这几个指标的变化对亚临床AS患病风险的预测。首先将CE16：1、CE22：6及Δ9-desaturase根据四分位数分为4组，建立模型1，进行Logistic回归和Wald检验分析，见表3。与最低四分位数(Q1：CE16：1≤1.47%)相比，CE16：1最高三分位数(Q3：1.79≤CE16：1<2.21)患亚临床AS的比值比(OR)为2.62(95%CI：1.11～6.15，Waldχ2值：4.857，P＝0.028)。与最低四分位数(Q1：CE22：6≤0.44%)相比，CE22：6最高四分位数(Q4：CE22：6>0.71%)患亚临床AS的OR值为0.28(95%CI：0.12～0.67，Waldχ2值：8.011，P<0.05)。与最低四分位数(Q1：Δ9-desaturase≤0.13)相比，Δ9-desaturase最高四分位数(Q4：Δ9-desaturase>0.19)患亚临床AS的OR值为2.72(95%CI：1.16～6.38，Waldχ2值：5.277，P<0.05)。校正年龄、性别、BMI、TC、TG、HDL-C、LDL-C等可能混杂因素后建立模型2，行Logistic回归和Wald检验，CE22：6的最高四分位数与最低四分位数的OR值为0.29，依然具有显著性意义，且校正前后其浓度水平随着四分位数增大患亚临床AS疾病的OR值变小。

　　　　而CE16：1和Δ9-desaturase虽然在模型1表现出差异统计学意义，但是在校正年龄、性别、BMI、TC、TG、HDL-C、LDL-C等混杂因素后，该显著性不再具有统计学意义。本结果表明CE22：6含量高时对亚临床AS可能具有保护作用。

　　　　三、血清胆固醇酯脂肪酸含量与其他生化指标相关性分析

　　　　进一步采用Spearman偏相关分析CE22：6与心血管疾病其他危险指标间的关系，结果显示CE22：6和ApoA、TC和HDL-C均呈负相关(r分别为－0.166、－0.149和－0.194；均P<0.05)，而与其他指标关系无统计学差异，见表4。

　　　　讨论

　　　　亚临床AS疾病是心血管疾病的前期病变，预防和控制亚临床AS疾病可有效减少心血管疾病的发生和发展。早期预防是降低心血管事件的最为经济有效的方式，饮食脂肪性质与心血管疾病发生发展密切相关，通过监控饮食脂肪，将以AS为病理基础的心血管事件的预防提前到亚临床阶段是早期预防的有效手段。CE22：6属于Omega-3脂肪酸中的一种，其在体内不能合成，仅可从外源Omega-3脂肪酸补充剂及深海鱼类获取，体内含量可反映摄食脂肪酸性质。大量的研究显示Omega-3脂肪酸可以保护心血管、降低动脉粥样硬化的发生风险[3]，本研究中CE22：6同样显示出对亚临床AS的预防作用。

　　　　本研究通过比较老年亚临床阶段AS患者的血清胆固醇酯脂肪酸性质发现，CE16：1和Δ9-desaturase显著高于对照组，CE22：6则显著低于对照组。提示CE16：1和Δ9-desaturase可能是亚临床AS疾病的危险因素，而CE22：6则对该疾病具有保护作用。进一步进行Logistic回归分析显示，CE16：1(三分位数)、Δ9-desaturase和CE22：6在模型1中均表现出统计学差异，在校正年龄、性别、BMI、TC、TG、HDL-C、LDL-C等混杂因素后，只有CE22：6仍具有显著的统计学意义。表明CE22：6对预防亚临床AS的发生具有保护作用。

　　　　Omega-3脂肪酸主要是指CE20：5和CE22：6。本研究除了分析CE20：5和CE22：6，也分析了Omega-3脂肪酸与亚临床AS的相关关系，结果显示同CE22：6相似，Omega-3最高四分位数处于亚临床AS的OR为0.37，校正可能的混杂因素后经Logistic回归和Wald检验，最高四分位数与最低四分位数的OR值依然具有显著性意义。但同样属于Omega-3脂肪酸的CE20：5则未显示出对亚临床AS的保护作用，对此尚需进一步大样本量研究。另外，其他脂肪酸也未显示出对亚临床AS的显著性关系，目前的研究显示这些脂肪酸与心血管疾病的关系尚不一致，有待进一步研究。

　　　　虽然结果显示CE22：6是亚临床AS疾病的保护因素，但CE22：6与传统的心血管疾病保护作用指标HDL-C则呈负相关。这个结论与我们之前有关2型糖尿病的研究结果[7]一致。CE22：6与HDL-C的相互关系及二者对亚临床AS和心血管疾病的关系需要进行另外的研究。

　　　　综上所述，CE22：6可能对老年亚临床AS具有保护作用。食用Omega-3脂肪酸补充剂及深海鱼类、平衡各脂肪酸摄入、降低包含胆固醇在内的血脂水平对防治亚临床AS具有重要意义。

　　血液净化疗法：

　　对高血压、高血脂、高血糖、风湿、肿瘤体制、慢性炎症、过敏体质等有非常好的治疗作用。血液净化后，达到身体内外环境平衡。

　　血液净化疗法是什么？

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　　血液净化的治疗方式包括：血浆置换疗法(PE/PA/DFPP)、血液透析(HD)、血液灌流(HP)等。

　　血液净化疗法的优势

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　　◆高精密度＋高安全度

　　◆治疗效果显著，副作用少。效果亲眼可见，从而更容易提高对生活习惯改善的积极性。

　　◆在心肌梗塞和脑梗塞的预防方面，成为了生活习惯指导和药物治疗以外的新型治疗手段。

　　◆作为针对糖尿病等引起的足坏疽・下肢截肢的早期对策效果显著。

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　　血液净化疗法适宜人群

　　○有高血压、高血脂、高血糖及胆固醇偏高的人群

　　○有脑梗塞、心肌梗塞风险的情况